E-book details

Mikrokalorymetryczne badania przemian konformacyjnych albuminy poddanej działaniu wybranych czynników fizykochemicznych

Mikrokalorymetryczne badania przemian konformacyjnych albuminy poddanej działaniu wybranych czynników fizykochemicznych

Anna Michnik

Ebook
W pracy przedstawiono i przedyskutowano wyniki badań przemian strukturalnych surowiczej albuminy ludzkiej i wołowej, przebiegających pod wpływem kontrolowanego wzrostu temperatury w roztworach wodnych. Zastosowanie wysokiej jakości czułego mikrokalorymetru pozwoliło prześledzić subtelne zmiany zachodzące w białku pod wpływem takich czynników środowiskowych, jak radiowe (RF) i ultrafioletowe (UV) promieniowanie elektromagnetyczne. Udokumentowano występowanie różnic w przebiegu termicznego rozfałdowania albuminy wolnej i zawierającej kwasy tłuszczowe, reakcji obydwu form białka na promieniowanie UV oraz w wiązaniu denaturantów (etanolu). Połączenie danych kalorymetrycznych z odpowiednim modelem matematycznym pozwoliło scharakteryzować założony proces termicznej denaturacji trójdomenowego białka, jakim jest albumina.

Spis treści

 

Wprowadzenie / 7

 

1. Białka: konformacja, pojemność cieplna / 13

1.1. Stan konformacyjny białka / 13

1.2. Pojemność cieplna białek / 15

 

2. Albumina — struktura i funkcje / 20

 

3. Badania DSC białek / 24

3.1. Termiczne rozfałdowanie białka / 24

3.2. Aspekty kinetyczne w procesie denaturacji białek — model Lumry—Eyringa / 31

 

4. Analiza dekonwolucyjna krzywych DSC / 35

4.1. Podstawy analizy dekonwolucyjnej / 35

4.2. Przejścia niezależne / 37

4.2.1. Model niezależnych przejść dwustanowych, uwzględniający efekty ΔCp / 39

4.2.2. Model niezależnych przejść dwustanowych, z wykluczeniem efektów ΔCp / 40

4.2.3. Model niezależnych przejść niedwustanowych / 40

4.3. Przejścia sekwencyjne / 41

4.4. Pojedyncze przejście dwustanowe z dysocjacją podjednostek / 42

 

5. Proces termicznej denaturacji albuminy w roztworach wodnych / 44

5.1. Charakterystyka DSC termicznej przemiany pomiędzy stanem natywnym i zdenaturowanym albuminy / 44

5.2. Specyfika termicznych przemian konformacyjnych albuminy ludzkiej i wołowej / 48

5.3. Wpływ obecności kwasów tłuszczowych na charakter termicznego rozfałdowania albuminy / 52

5.4. Analiza dekonwolucyjna krzywych DSC albuminy / 54

 

6. Termiczna denaturacja albuminy surowicy w roztworach wodnych modyfikowanych wybranymi czynnikami chemicznymi / 63

6.1. Przemiany BSA w roztworach o pH w zakresie 3,5—7,0 / 63

6.2. Proces termicznej denaturacji HSA i HSAf w roztworach wodnych etanolu / 71

6.2.1. Białka w roztworach wodno-alkoholowych / 71

6.2.2. Proces termicznej denaturacji HSA i HSAf w obecności etanolu / 73

6.2.3. Wiązanie etanolu do albuminy / 75

6.2.4. Analiza dekonwolucyjna krzywych DSC albuminy w roztworach etanol-woda / 79

 

7. Skutki ekspozycji roztworów wodnych albuminy na wybrane zakresy promieniowania elektromagnetycznego / 84

7.1. Wpływ promieniowania o częstości radiowej na trwałość konformacji albuminy wołowej / 84

7.2. Konformacyjna reorganizacja albuminy pod wpływem promieniowania UV / 92

 

Podsumowanie / 105

 

Dodatek / 109

D I. Wiązanie kwasów tłuszczowych do albuminy / 109

D II. Siły stabilizujące strukturę białka / 111

D III. Wpływ środowiska na konformacyjną stabilność makromolekuły białka / 114

D IV. Pomiary kalorymetryczne i spektrofotometryczne / 119

D V. Analiza statystyczna wyników / 120

 

Literatura / 121

 

Summary / 139

Zusammenfassung / 141

  • Title: Mikrokalorymetryczne badania przemian konformacyjnych albuminy poddanej działaniu wybranych czynników fizykochemicznych
  • Author: Anna Michnik
  • ISBN: 978-8-3801-2866-8, 9788380128668
  • Date of issue: 2016-03-18
  • Format: Ebook
  • Item ID: e_1p81
  • Publisher: Wydawnictwo Uniwersytetu Śląskiego